奶牛乳腺microRNA研究进展

书名：奶牛乳腺microRNA研究进展
作者：南雪梅，王梦芝，熊本海主编
ISBN：978-7-5116-4573-9
出版社：中国农业科学技术出版社
出版日期：2019.12
MicroRNAs（miRNAs）是一类长度约为22nt小分子RNA，其在多种生物学进程中发挥重要作用。乳腺细胞或乳腺的组织培养物是研究乳腺生理学功能的良好模型，并同样有助于miRNA功能的研究，所以对本研究室构建的DBMEC中microRNA进行分析与鉴定，将是所有研究的基础。首先，使用TRIzol法和聚丙烯酰胺凝胶电泳提取并分离DBMEC中的miRNA，随后，分离的小分子RNA经过扩增后开始测序。通过茎环结构及PCR验证试验确定新的Novel miRNAs的存在。为了确定新miRNA在不同组织间的分布，本研究通过茎环RT-PCR和PCR产物测序方法检测了泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺、肝脏、脂肪组织、脾脏、回肠及肾脏中新miRNA的表达。通过生物学分析，solexa测序共获得12323451个reads，其中有效reads 11979706个，9428122个reads属于miRNAs。后续分析表明bta-mir-184表达丰度最高，388个定位于典型茎环结构的小分子能够匹配到已知的miRNA茎环中，同时，38个定位于新茎环结构的miRNA被确定为是新的miRNA。新miRNA中的一种，bta-U21在泌乳中期奶牛中是乳腺特有的，7个新miRNA，包括bta-U21在内，表现出组织分布的局限性。本书正式基于奶牛乳腺microRNA研究基础，将这些研究汇总，并进行梳理总结，形成奶牛乳腺microRNA的前沿内容。以便研究人员了解和参考使用。